一、細(xì)胞基本屬性 |
細(xì)胞名稱 | SCC7小鼠鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系(種屬鑒定報告) |
細(xì)胞別稱 | SCC-7;SCCVII/St;SCCVII;SCC VII;小鼠鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 |
種屬來源 | 小鼠 |
組織來源 | 皮膚 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞類型 | 鱗狀癌細(xì)胞系 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) |
細(xì)胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
保藏機構(gòu) | 中國典型培養(yǎng)物保藏中心細(xì)胞庫 |
培養(yǎng)基 | DF12+10% FBS+1%PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞貨期 | 現(xiàn)貨,1周左右 |
發(fā)貨方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 |
特別說明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 |
到貨方式 | 復(fù)蘇細(xì)胞/T25瓶運輸 |
收貨處理 | 1.收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,是否有破損、漏液、渾濁等現(xiàn)象。如果有,請立即和我們聯(lián)系;如果沒有,請您用75%酒精消毒細(xì)胞瓶外壁,再將其置于37度培養(yǎng)箱靜置4h。 2.靜置后觀察細(xì)胞狀態(tài),在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請在10X和20X物鏡下,同時給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。拍照反饋給我們。 |
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng) |
傳代方法 | 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2.加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
到貨方式 | 凍存細(xì)胞/1ml凍存管運輸 |
收貨處理 | 1.干冰運輸?shù)募?xì)胞到貨,請檢查干冰是否完全揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞,如若不能復(fù)蘇請立即轉(zhuǎn)入液氮凍存。 |
培養(yǎng)皿/瓶 | 一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
復(fù)蘇操作 | 1.將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。 2.在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。 3.然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。 4.第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 3. 凍存細(xì)胞發(fā)貨2管,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。 4. 申請售后時請?zhí)峁┘?xì)胞收貨時及反饋售后當(dāng)天細(xì)胞清晰照片及培養(yǎng)信息,建議客戶在細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 5.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 6. 細(xì)胞在不同實驗室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異,對于此類細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境生長的行為,不予過度解釋或免費售后。 |
三、細(xì)胞凍存操作 |
凍存液配方 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
凍存密度 | 如果是有要求每管要凍多少細(xì)胞,那就用1ml完培重懸后,取部分按平時方法計數(shù),剩下的細(xì)胞按計數(shù)需要的細(xì)胞量凍存即可。 如果沒要求,那就按平時,一個皿凍一管。 |
凍存方法 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例 1.收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加1 mL血清重懸細(xì)胞,進行細(xì)胞計數(shù)。 2.根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。 3.將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項 | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案 |
SCC7細(xì)胞文獻(xiàn)溯源
1996年始,迄今為止,關(guān)于小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞系的文獻(xiàn)已有118篇。


在pubmed數(shù)據(jù)庫中用“SCC7 murine”搜索該關(guān)鍵詞,第一篇為1996年P(guān) G Braunschweiger在Radiat
Res.發(fā)表的“Radioresistance in murine solid tumors induced by interleukin-1”。
SCC7細(xì)胞文獻(xiàn)概述
IL-1α對腫瘤細(xì)胞放射敏感性的影響尚未充分研究。
IL-1α給藥后,腫瘤克隆細(xì)胞表現(xiàn)出放射抵抗性,特征是放射劑量參數(shù)的變化,類似于缺氧條件下的放射抵抗性。
IL-1α與替拉帕胺具有協(xié)同抗腫瘤作用,表明放射抵抗性與缺氧有關(guān)
放射抵抗性是暫時的,可能在12小時內(nèi)發(fā)生重新供氧。
在有氧條件下,IL-1α對SCC-7細(xì)胞的無直接影響,但在原代培養(yǎng)中可誘導(dǎo)放射抵抗性。
腫瘤巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的氧化應(yīng)激可能是IL-1α在體外誘導(dǎo)放射抵抗性的原因。
體內(nèi)和體外的氧化應(yīng)激響應(yīng)可能具有不同的機制來調(diào)節(jié)腫瘤放射敏感性。
SCC7細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域
小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞(SCC7)是一種高糖酵解的細(xì)胞類型,這一特性在腫瘤細(xì)胞中常見,因為它們通常在低氧環(huán)境下進行代謝,需要快速獲取能量。
SCC7具有強大的增殖能力,研究人員常用SCC7來研究頭頸鱗癌的增殖和凋亡,以及免疫過程在當(dāng)中起到的關(guān)鍵作用。
由于頭頸鱗癌腫瘤具有很強的生長和轉(zhuǎn)移能力,學(xué)者也經(jīng)常利用SCC7細(xì)胞研究糖基化和自糖基化在細(xì)胞形態(tài)和功能中起關(guān)鍵作用。
研究人員可以利用SCC7細(xì)胞構(gòu)建裸鼠/SCID小鼠/NOD-SCID小鼠荷瘤鼠模型,來研究頭頸鱗癌的發(fā)病機制、治療策略和預(yù)后分析。預(yù)后分析通常包括對小鼠存活時間、腫瘤體積、轉(zhuǎn)移情況等參數(shù)的監(jiān)測和統(tǒng)計分析。研究者可能會采用生存分析方法,比如Kaplan-Meier生存曲線和Cox比例風(fēng)險模型,來評估不同處理組間的生存差異和相關(guān)因素的影響。
SCC7還具有基因沉默機制,用于調(diào)節(jié)細(xì)胞基因表達(dá);外泌體細(xì)胞間可以起到信息傳遞的作用。研究人員可以利用SCC7研究這些機制,使用納米藥物靶向干預(yù)靶點,抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移,同時增強免疫系統(tǒng)的反應(yīng)。
在治療方面,研究人員可以利用移植該細(xì)胞的荷瘤鼠模型研究丹酚酸等藥物的抑癌和促凋亡機制;以及使用金納米棒作為化療耐藥干預(yù)手段,理解頭頸鱗癌的生物學(xué)特征和潛在治療策略。
SCC7細(xì)胞標(biāo)志物
CK5、CK14、CK17、p63、E-cadherin等,這些標(biāo)志物通常參與了鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程。
答:部分細(xì)胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細(xì)胞的培養(yǎng)條件,為了避免細(xì)胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應(yīng),建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
答:細(xì)胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細(xì)胞貨期一般一周左右,復(fù)蘇活細(xì)胞一個T25瓶發(fā)貨;凍存細(xì)胞有庫存的話,一般當(dāng)天或者隔天可以發(fā)貨,細(xì)胞系凍存細(xì)胞擔(dān)心客戶復(fù)蘇不成功所以贈送了一管,實際發(fā)貨2管;原代凍存細(xì)胞發(fā)貨1管,凍存細(xì)胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運輸,所以凍存細(xì)胞需額外支付干冰及運輸費200元。
答:一般不建議重復(fù)利用,特別是貼壁不牢固細(xì)胞,重復(fù)利用會導(dǎo)致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。
答:不能回收使用的,運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多,所以收到細(xì)胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請及時按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。
答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān),偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細(xì)胞狀態(tài)有影響,可以復(fù)蘇看下。
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);
5.細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);