本視頻為廈門逸漠生物科技有限公司出品關于復蘇細胞到貨如何處理，我們對每一步操作都做了演示，以便實驗者更好地理解常溫運輸細胞轉(zhuǎn)移實驗過程。

細胞收貨處理(T25瓶)

實驗準備

提前開啟紫外照射30min消毒滅菌，工作臺開燈通風10min，用75%酒精擦拭臺面

所需試劑物品

完全培養(yǎng)基、胰酶、PBS

到貨處理

1.在細胞間拆封包裹，閱讀細胞說明書和檢測報告

2.取出T25瓶，檢查是否在運輸過程中破損，在顯微鏡下鏡檢并拍照存檔

3.放入培養(yǎng)箱穩(wěn)定細胞狀態(tài)，約2-4小時

4.2-4小時后拿出T25細胞瓶，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)，細胞狀態(tài)穩(wěn)定密度85%以上，即進行細胞轉(zhuǎn)移步驟

細胞遷移步驟

第一步：吸出運輸用培養(yǎng)基，加入5m」1xPBS清洗1遍，去掉PBS，加入2m1胰酶消化，并放入培養(yǎng)箱孵育1-2min

第二步：在顯微鏡下觀察細胞是否脫落，加入3mI完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打細胞，使其脫離瓶壁

第三步：細胞懸液轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm離心5min

第四步：拿出一個新的10cm培養(yǎng)皿，加入8-10ml完 全培養(yǎng)基，在皿上標記細胞名稱，培養(yǎng)基名稱，日期

第五步：離心結(jié)束后，用75%的酒精噴管身后，放回工作臺中，去上清，加入1m]完全培養(yǎng)基，重懸后加到10cm培養(yǎng)皿中，放入37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)

注意事項

1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系

2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照)，記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)

3.由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決

4.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致