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細(xì)胞株購(gòu)買(mǎi):18046200267 廈門(mén)愛(ài)恪信生物細(xì)胞株引進(jìn)ATCC,DSMZ,JCRB,ECACC,CCTCC,昆明細(xì)胞庫(kù)等保藏中心,正規(guī)來(lái)源,細(xì)胞準(zhǔn)確

a549可以用dmem高糖嗎,a549細(xì)胞培養(yǎng)方法

發(fā)布時(shí)間:2024-07-18 17:15:07 細(xì)胞資源庫(kù)平臺(tái) 訪問(wèn)量:149

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞簡(jiǎn)介

A549細(xì)胞又稱為肺癌人類肺泡基底上皮細(xì)胞,最早是在1972年由D.J.Giard等人通過(guò)一位58歲的白人男性的外植體腫瘤,轉(zhuǎn)移并培養(yǎng)肺腫瘤組織而得到的。

在自然界中,這些細(xì)胞是鱗狀的,它們可以通過(guò)肺泡擴(kuò)散傳播一些物質(zhì),如水和電解質(zhì)。如果將A549細(xì)胞體外培養(yǎng),它們會(huì)成長(zhǎng)為單層細(xì)胞,附著或緊貼在培養(yǎng)瓶上。人肺泡上皮細(xì)胞株A549可以固定或懸掛在體外的溶液。這些細(xì)胞的另一個(gè)特點(diǎn)是他們能夠合成卵磷脂,并且含有高度不飽和的脂肪酸,這對(duì)于維持細(xì)胞膜磷脂有重要意義。

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞形態(tài)特征

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞形態(tài)圖片

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞產(chǎn)品信息

細(xì)胞名稱:A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞別稱:A 549; A549; NCI-A549; A549/ATCC; A549 ATCC; A549ATCC; hA549

種屬來(lái)源:人

年齡性別:58歲,白人男性

組織來(lái)源:肺

形態(tài)特性:貼壁生長(zhǎng),上皮細(xì)胞樣

STR位點(diǎn)信息:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:13;D21S11:29;D2S1338:24;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14;

抗原表達(dá)情況:The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CCL-185 ATCC; CRM-CCL-185 ATCC; CRL-7909 BCRC; 60074 BCRJ; 0033 DSMZ; ACC-107 ECACC; 86012804

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間:~22 hours

抗原表達(dá)情況:The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

染色體:60~66,XY

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞培養(yǎng)方法

細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件

實(shí)驗(yàn)室條件

1.無(wú)菌環(huán)境:無(wú)菌室包括更衣室,緩沖間,風(fēng)淋間,操作間

2.儀器設(shè)備:超凈工作臺(tái)-操作平臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱-細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境、倒置顯微鏡-觀察細(xì)胞、離心機(jī)-離心收集細(xì)胞、冰箱-放置培養(yǎng)基等試劑、水浴鍋-復(fù)蘇細(xì)胞、真空泵-收集廢液、滅菌鍋-滅菌、干燥箱-烘干器材、液氮罐-凍存細(xì)胞、純水儀-制備一級(jí)水

3.器材耗材:玻璃瓶、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、巴士管、離心管、移液槍、槍頭(白色0-10ul;黃色20-200ul;藍(lán)色100-1000ul)、濾器,吸管,多孔培養(yǎng)皿、6cm皿、10cm皿,培養(yǎng)瓶等。

4.試劑:DMEM高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基、FBS胎牛血清、雙抗、胰酶(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)、pbs

操作者工作范疇

1.無(wú)菌操作:洗手,戴手套,穿實(shí)驗(yàn)服,常噴75%酒精

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞復(fù)蘇方法

1)準(zhǔn)備:紫外線照臺(tái)30min,提前打開(kāi)水浴鍋設(shè)置37℃,培養(yǎng)基臨用前放水浴箱里溫育20分鐘(或者放在超凈工作臺(tái)常溫放30min)。在操作臺(tái)上擺放好物品,左邊放完全培養(yǎng)液,1mL槍頭(已滅菌),培養(yǎng)皿,右上角放廢液缸,1mL移液槍,3mL巴氏管。檢查離心機(jī),廢液泵。

2)待水浴鍋溫度達(dá)到37℃時(shí),戴上手套和護(hù)目鏡,從-196℃液氮罐中取出凍存管,將含有1mLA549細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,同時(shí)不斷輕輕搖動(dòng)凍存管,盡量保證凍存管內(nèi)細(xì)胞1min內(nèi)融化,加4mL培養(yǎng)基混合均勻,移入離心機(jī)中100rpm離心3min,以75%酒精噴凍存管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。

3)用3mL巴氏管取5mL新鮮培養(yǎng)基到一個(gè)新的6cm培養(yǎng)皿中,(若離心后細(xì)胞量較多,可取12mL新鮮培養(yǎng)基到一個(gè)新的10cm培養(yǎng)皿中),標(biāo)記日期、所用培養(yǎng)基名稱和細(xì)胞名稱。

4)用廢液泵(吸力不要太大)取一個(gè)黃色槍頭從凍存管中吸走上清,取1mL新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后(充分混勻),將A549細(xì)胞懸液加入到培養(yǎng)皿中,將培養(yǎng)皿在超凈工作臺(tái)上以畫(huà)“8”字法鋪勻細(xì)胞(一般培養(yǎng)皿在臺(tái)子上畫(huà)30個(gè)8字即可鋪勻),最后在顯微鏡下檢測(cè)是否鋪勻細(xì)胞。

5)確定A549細(xì)胞已鋪勻后,再把培養(yǎng)皿放入CO2培養(yǎng)箱過(guò)夜。(盡量平直放入不要晃動(dòng)),第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

A-549人肺腺癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

細(xì)胞顆粒感較重

細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞內(nèi)黑點(diǎn)及細(xì)胞外顆粒較多,建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞;

傳代、復(fù)蘇注意細(xì)胞狀態(tài)

細(xì)胞消化或者復(fù)蘇操作不當(dāng)容易導(dǎo)致細(xì)胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒,進(jìn)而影響活細(xì)胞狀態(tài),注意消化或復(fù)蘇過(guò)程盡量輕柔,嚴(yán)格控制消化時(shí)間和復(fù)蘇操作規(guī)范,傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細(xì)胞,建議換液一次去除死亡細(xì)胞;

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞傳代操作

1)從培養(yǎng)箱拿出A549 cell,在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度和細(xì)胞狀態(tài),當(dāng)A549細(xì)胞狀態(tài)良好,且密度達(dá)到85%左右的時(shí)候即可進(jìn)行傳代;

2)打開(kāi)廢液泵,用廢液泵吸頭(吸力不要太大)取一個(gè)藍(lán)色槍頭吸走上清廢液,用巴士管取4ml不含鈣、鎂離子的1xPBS(6cm皿)到細(xì)胞培養(yǎng)皿中(若是10cm皿則取8ml1xPBS),輕輕晃動(dòng)以清洗細(xì)胞表面1-2次;

3)用廢液泵吸走PBS廢液,加1mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,拿起培養(yǎng)皿輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)以便胰酶浸泡到每個(gè)細(xì)胞,消化1-3min(根據(jù)細(xì)胞貼壁情況判斷,貼壁較牢的消化時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)或者放入CO2培養(yǎng)箱中消化幾分鐘)后,在顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓變亮,一旦發(fā)現(xiàn)大量細(xì)胞胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大,即將脫離培養(yǎng)皿底,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

4)用1ml移液槍輕柔吹打,保證培養(yǎng)皿底的每個(gè)角落都吹打到,邊緣處也不能忽略(吹打時(shí)盡量避免產(chǎn)生氣泡,因其對(duì)細(xì)胞有傷害;需輕柔吹打,用力吹打?qū)?xì)胞也有傷害),把培養(yǎng)瓶中所有細(xì)胞懸液用吸1ml移液槍移入無(wú)菌離心管中。

5)將裝有A549細(xì)胞懸液的離心管放入離心機(jī)中(配平),1000轉(zhuǎn)離心3-5min,用廢液泵取一個(gè)黃色槍頭從凍存管中吸走上清,取1-2mL新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后(充分混勻),將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,將培養(yǎng)皿在超凈工作臺(tái)上以畫(huà)“8”字法鋪勻細(xì)胞(一般培養(yǎng)皿在臺(tái)子上畫(huà)30個(gè)8字即可鋪勻),最后在顯微鏡下檢測(cè)是否鋪勻細(xì)胞。

6)確定A549細(xì)胞已鋪勻后,再把培養(yǎng)皿放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。(盡量平直放入不要晃動(dòng))。第二天再觀察細(xì)胞密度。

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凍存方法

從培養(yǎng)箱拿出A549細(xì)胞,在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度和細(xì)胞狀態(tài),待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好且存活率高的狀態(tài)下,細(xì)胞密度達(dá)80–90%時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存操作,以T25瓶為例

細(xì)胞凍存步驟

a.收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)所有培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入無(wú)菌離心管,裝入無(wú)菌離心管中,1000rpm條件下離心4min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b.根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,在A549細(xì)胞凍存管上貼上細(xì)胞標(biāo)簽(細(xì)胞標(biāo)簽上包含:細(xì)胞名稱、凍存日期、培養(yǎng)用的培養(yǎng)基)。

c.將凍存管入庫(kù)到-80度凍存盒里,放置24小時(shí)后,即可移入液氮中保存,標(biāo)記好入庫(kù)位置和凍存日期。

a549細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題

a549可以用dmem高糖嗎?

a549細(xì)胞培養(yǎng)條件就是高糖的DMEM加上血清還有雙抗。

a549細(xì)胞一分二多久長(zhǎng)滿

a549細(xì)胞長(zhǎng)得挺快的,一分二的話,一般1-2天就可以長(zhǎng)滿了。

a549細(xì)胞消化時(shí)間多久

A549細(xì)胞培養(yǎng)箱消化1-2分鐘即可。

a549是肺腺癌還是肺鱗癌

A549細(xì)胞是一種人類肺腺癌細(xì)胞系。

A549細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)

A549細(xì)胞是一種人類肺腺癌細(xì)胞系,廣泛應(yīng)用于肺腺癌的研究中。在細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)方面,A549細(xì)胞表現(xiàn)出以下幾個(gè)特點(diǎn):

1.細(xì)胞形態(tài)

A549細(xì)胞呈橢圓形或卵圓形,大小約為15-30μm。細(xì)胞質(zhì)呈淡紫紅色,細(xì)胞核位于細(xì)胞中央,呈圓形或橢圓形,直徑約為10-15μm。細(xì)胞核染色質(zhì)均勻分布,核仁明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的細(xì)胞器,如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體等。

2.細(xì)胞表面特征

A549細(xì)胞表面呈現(xiàn)出微絨毛狀結(jié)構(gòu),使細(xì)胞表面顯得粗糙。細(xì)胞表面還存在一些微細(xì)突起,使細(xì)胞具有一定的粘附性。這些突起結(jié)構(gòu)有助于細(xì)胞與周?chē)?xì)胞或基質(zhì)進(jìn)行黏附和相互作用。

3.細(xì)胞增殖特點(diǎn)

A549細(xì)胞具有較高的增殖能力,在培養(yǎng)基中可形成較為緊密的細(xì)胞群。細(xì)胞群中的細(xì)胞緊密排列,呈薄板狀或長(zhǎng)條狀。細(xì)胞生長(zhǎng)速度較快,通常在培養(yǎng)基中可見(jiàn)到細(xì)胞的分裂和增殖現(xiàn)象。

4.細(xì)胞遷移

A549細(xì)胞具有一定的遷移能力,在培養(yǎng)基中可形成細(xì)胞單層的移行現(xiàn)象。細(xì)胞從初始位置逐漸移動(dòng)到周?chē)瞻讌^(qū)域,形成新的細(xì)胞單層。細(xì)胞遷移速度較快,表現(xiàn)出較強(qiáng)的侵襲性。

多年來(lái),A549細(xì)胞已經(jīng)得到了很好的表征,對(duì)于經(jīng)常將它們用作體外和體內(nèi)模型的研究人員來(lái)說(shuō)很有價(jià)值。A549細(xì)胞是上皮細(xì)胞,在體外作為單層粘附生長(zhǎng),并作為合適的轉(zhuǎn)染宿主。這也意味著它們是排列在器官和組織表面的細(xì)胞。A549腺癌細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)豐富的DMEM培養(yǎng)基中的實(shí)驗(yàn)室中生長(zhǎng)。當(dāng)它們以這種方式生長(zhǎng)時(shí),它們形成單層細(xì)胞。A549細(xì)胞成為肺癌研究模型的黃金標(biāo)準(zhǔn),現(xiàn)在常用于細(xì)胞培養(yǎng)研究,作為研究人類肺癌的模型。

5.細(xì)胞凋亡

A549細(xì)胞在一定條件下可發(fā)生凋亡現(xiàn)象。凋亡細(xì)胞通常具有以下特點(diǎn):細(xì)胞體積縮小,細(xì)胞核凝縮和碎裂,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)凋亡小體等。凋亡細(xì)胞通常會(huì)被周?chē)?xì)胞或者巨噬細(xì)胞吞噬,從而完成清除和消除的過(guò)程。

6.遺傳變異

A549細(xì)胞在長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生一定程度的遺傳變異。研究表明,A549細(xì)胞具有多倍體性,染色體數(shù)目變異較大,存在著染色體缺失、重排和復(fù)制等遺傳變異。這些遺傳變異可能導(dǎo)致A549細(xì)胞系在不同實(shí)驗(yàn)條件下表現(xiàn)出異質(zhì)性。

7.生物學(xué)行為

a.腫瘤特性:A549細(xì)胞具有腫瘤細(xì)胞的特性,包括快速增殖、無(wú)限增殖潛能和抗凋亡能力。這使得A549細(xì)胞成為研究肺癌生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移等過(guò)程的理想模型。

b.腫瘤標(biāo)志物:A549細(xì)胞表達(dá)多種腫瘤標(biāo)志物,如細(xì)胞角蛋白、腫瘤相關(guān)抗原和轉(zhuǎn)錄因子等。這些標(biāo)志物的表達(dá)特征可用于研究肺癌的診斷和治療靶點(diǎn)的篩選。

c.耐藥性:A549細(xì)胞對(duì)多種抗癌藥物具有一定程度的耐藥性。這使得A549細(xì)胞可用于研究肺癌耐藥機(jī)制以及開(kāi)發(fā)新的抗癌藥物。

A549細(xì)胞應(yīng)用

1.肺癌發(fā)病機(jī)制研究:A549細(xì)胞可用于研究肺癌的發(fā)病機(jī)制,如細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移等過(guò)程。通過(guò)對(duì)A549細(xì)胞的相關(guān)基因和信號(hào)通路的研究,可以深入了解肺癌的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制。

2.肺癌治療研究:A549細(xì)胞可用于評(píng)估抗腫瘤藥物的療效和毒副作用。通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物模型研究,可以篩選和評(píng)估新的抗癌藥物,并探索肺癌治療的新靶點(diǎn)和策略。

3.肺癌耐藥機(jī)制研究:通過(guò)研究A549細(xì)胞的耐藥性機(jī)制,可以揭示肺癌耐藥的分子機(jī)制,為克服耐藥性提供理論依據(jù)和新的治療策略。

人肺癌細(xì)胞A549具有許多特征,包括來(lái)源、形態(tài)學(xué)特征、遺傳變異和生物學(xué)行為等方面。它是肺癌研究中廣泛應(yīng)用的細(xì)胞系之一。通過(guò)研究A549細(xì)胞,可以深入了解肺癌的發(fā)病機(jī)制、評(píng)估抗癌藥物的療效和毒副作用,以及研究肺癌耐藥性的機(jī)制。A549細(xì)胞在肺癌研究和治療中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,為肺癌的早期診斷、治療和預(yù)后評(píng)估提供了重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)P秃脱芯抗ぞ摺?/p>

A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞相關(guān)研究

有研究探討蝙蝠葛提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549誘導(dǎo)凋亡和抗增殖作用及其機(jī)制,為開(kāi)發(fā)抗腫瘤新中藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法應(yīng)用MTT法測(cè)定蝙蝠葛提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549的生長(zhǎng)抑制作用;通過(guò)倒置顯微鏡、光學(xué)顯微鏡觀察腫瘤細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)A549細(xì)胞的凋亡率;應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)藥物處理前后凋亡相關(guān)蛋白酶caspase-3、caspase-8、caspase-9的表達(dá)。結(jié)果(1)MTT法檢測(cè)結(jié)果:蝙蝠葛提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549有明顯的抑制生長(zhǎng)的作用,且呈現(xiàn)出濃度的依賴性;(2)倒置顯微鏡觀察結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組腫瘤細(xì)胞體積變小、變圓,核染色質(zhì)凝集,細(xì)胞間連接疏松,貼壁能力減弱;(3)HE染色觀察結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組腫瘤細(xì)胞體積變小、變圓,核染色質(zhì)濃縮或染色質(zhì)塊形成,有的細(xì)胞膜起泡形成凋亡小體;(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示:蝙蝠葛提取物可以誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生凋亡,加藥組出現(xiàn)亞二倍體峰。結(jié)論(1)蝙蝠葛提取物在體外對(duì)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549有顯著的誘導(dǎo)凋亡作用;(2)蝙蝠葛提取物誘導(dǎo)凋亡作用機(jī)制可能通過(guò)上調(diào)caspase-3、caspase-8和caspase-9蛋白表達(dá),經(jīng)由細(xì)胞凋亡的死亡受體和線粒體通路完成凋亡的啟動(dòng)和執(zhí)行;(3)蝙蝠葛提取物具有顯著的體外抗腫瘤作用,有望開(kāi)發(fā)成一種新的抗腫瘤藥物。

此外,還有研究通過(guò)應(yīng)用RNAi技術(shù)沉默肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549中的PEG10基因,探討PEG10在肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞增殖及侵襲遷移過(guò)程中的作用。方法RPMI-1640培養(yǎng)肺癌A549細(xì)胞。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染shRNAPEG10細(xì)胞系;MTT及軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PEG10基因沉默對(duì)A549肺癌細(xì)胞增殖的影響;細(xì)胞劃痕試驗(yàn)和Transwell小室方法觀察PEG10基因沉默對(duì)A549肺癌細(xì)胞遷移能力的影響;逆轉(zhuǎn)錄RT-PCR、實(shí)時(shí)定量qRT-PCR及Westernblot檢測(cè)PEG10、β-catenin和其下游分子cmyc、MMPs、twist、E-cadherin、Vimentin表達(dá)水平的變化。結(jié)果PEG10干擾效率達(dá)65%;轉(zhuǎn)染后肺癌細(xì)胞劃痕愈合速度變慢;穿過(guò)Transwell小室的細(xì)胞數(shù)減少;克隆形成數(shù)目也降低,同時(shí)檢測(cè)到β-catenin及c-myc、MMPs、twist、Vimentin表達(dá)水平降低,E-cadherin表達(dá)水平升高。結(jié)論靶向封閉PEG10基因可下調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的關(guān)鍵因子β-catenin的表達(dá)水平,降低肺癌A549細(xì)胞增殖、侵襲及遷移能力,部分逆轉(zhuǎn)肺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。

另外,還有研究探討全反式維甲酸(ATRA)對(duì)人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞增殖及APLNR(apelinreceptor)基因表達(dá)的影響。方法采用四甲基偶氮唑藍(lán)(methylthiazolyltetrazolium,MTT)比色法檢測(cè)ATRA對(duì)體外培養(yǎng)的A549細(xì)胞增殖的抑制情況,光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)改變,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡,westernblot檢測(cè)APLNR蛋白、cyclinD1及p16蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果經(jīng)ATRA作用后,A549細(xì)胞增殖受到明顯抑制且抑制程度呈劑量及時(shí)間依賴性(P均<0.01);其細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化,細(xì)胞周期被阻滯于G0/G1期且細(xì)胞凋亡率明顯升高(P<0.01);westernblot結(jié)果顯示,隨著ATRA濃度的升高,APLNR蛋白及cyclinD1蛋白的表達(dá)水平降低,而p16蛋白的表達(dá)水平升高(P均<0.01)。結(jié)論ATRA可抑制A549細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡,且能下調(diào)APLNR基因的表達(dá)。

有研究探討Id1在人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549腫瘤細(xì)胞球中的表達(dá)情況,為肺癌干細(xì)胞的基因靶向治療提供理論依據(jù)。方法:應(yīng)用干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)A549細(xì)胞腫瘤細(xì)胞球,采用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肺癌腫瘤球細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ABCG2在肺癌腫瘤球細(xì)胞中的表達(dá)情況,Westernblotting檢測(cè)Id1在肺癌腫瘤球細(xì)胞中的表達(dá)情況。結(jié)果:與貼壁細(xì)胞相比,人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549腫瘤細(xì)胞球細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆能力,且高表達(dá)ABCG2,符合肺癌干細(xì)胞的特點(diǎn),Id1在人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549腫瘤細(xì)胞球細(xì)胞中高表達(dá)。結(jié)論:Id1可能成為靶向肺癌干細(xì)胞肺癌治療的靶點(diǎn)。

a549細(xì)胞參考文獻(xiàn)

[1] 蝙蝠葛提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549誘導(dǎo)凋亡作用的研究

[2] PEG10在人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549增殖及侵襲遷移過(guò)程中的作用

[3] 全反式維甲酸對(duì)人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞增殖及APLNR基因表達(dá)的影響

[4] Id1在人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549腫瘤細(xì)胞球中的表達(dá)

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