HEY人卵巢癌細(xì)胞來源

HEY細(xì)胞來源于歐洲女性患者高級別卵巢漿液性腺癌異種移植物(HX-62)，其最初生長于卵巢中分化乳頭狀囊腺癌患者的腹膜沉積物。HEY細(xì)胞顯示出在半固體培養(yǎng)物中生長的不同能力，并可以在免疫缺失的CBA/CJ小鼠中異種移植。HEY細(xì)胞顯示出對順式鉑有一定程度的抗性。

HEY人卵巢癌細(xì)胞用什么培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

HEY人卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

提前開啟紫外照射30min消毒滅菌，工作臺開燈通風(fēng)10min，用75%酒精擦拭臺面。

器材耗材：玻璃瓶、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、巴士管、離心管、移液槍、槍頭(白色0-10ul;黃色20-200ul；藍(lán)色100-1000ul)、濾器、吸管、多孔培養(yǎng)皿、6cm皿、10cm皿，培養(yǎng)瓶等。

試劑：DMEM培養(yǎng)液、緩沖液、PBS、消化液、血清、抗生素。

操作者工作范疇

無菌操作：洗手，戴手套，穿實(shí)驗(yàn)服，常噴 75%酒精

HEY人卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)條件

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS+PS

生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代方法：1:2至1:3，每周2-3次

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

HEY人卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)方法

1)HEY人卵巢癌細(xì)胞復(fù)蘇方法

將含有1 mLHEY細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻

在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻

然后將所有HEY細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)

第三天換液并檢查細(xì)胞密度

2)HEY人卵巢癌細(xì)胞傳代方法

如果HEY細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b.加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2ml，T75瓶2-3ml)，使消化液浸潤所有HEY細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加3-4ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c.將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含6-8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)HEY人卵巢癌細(xì)胞凍存方法

待HEY細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例

a.收集HEY細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b.根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c.將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

HEY人卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

hey細(xì)胞消化多久？

HEY人卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)箱消化2分鐘左右。不同的胰酶品牌消化時間不同，以實(shí)際為主。

hey細(xì)胞幾天能長好？

hey細(xì)胞倍增時間~30小時，一分二的話，一般2天左右可以傳代。

HEY人卵巢癌細(xì)胞文獻(xiàn)溯源

1970年始，迄今為止，關(guān)于人卵巢癌細(xì)胞(HEY)的文獻(xiàn)已有393篇。

在pubmed數(shù)據(jù)庫中用“hey cell line”搜索該關(guān)鍵詞，第一篇為1970年C S Crumpacker在J Virol.發(fā)表的“Adenovirus type 2-simian virus 40 hybrid population: evidence for a hybrid deoxyribonucleic acid molecule and the absence of adenovirus-encapsidated circular simian virus 40 deoxyribonucleic acid”。

HEY人卵巢癌細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域

人卵巢癌細(xì)胞系(HEY)是研究卵巢癌的關(guān)鍵模型，被廣泛應(yīng)用于癌癥生物學(xué)、藥物研發(fā)和腫瘤治療策略的探索，包括藥物敏感性、耐藥機(jī)制、細(xì)胞周期調(diào)控、信號通路研究以及免疫治療策略的評估等。

研究人員利用HEY細(xì)胞研究其遺傳特性(不穩(wěn)定性)?？梢詭椭芯咳藛T更好地理解卵巢癌的發(fā)病機(jī)制，并為開發(fā)治療方法提供重要信息。

當(dāng)卵巢癌細(xì)胞系植入裸鼠時，無論是皮下、腹膜腔內(nèi)還是卵巢囊內(nèi)，它們的生長能力各不相同。

學(xué)者常利用HEY細(xì)胞的耐藥機(jī)制開發(fā)新的治療方法，通常研究人員會建立了一個從一種對順鉑敏感的父細(xì)胞系中發(fā)展而來的抗順鉑的人類卵巢癌細(xì)胞系。該細(xì)胞系對藥物和放射線的抗性表明它可能成為研究鉑類化合物的有效工具。

HEY細(xì)胞在卵巢癌研究中具有廣泛的應(yīng)用，可用于多種實(shí)驗(yàn)，包括增殖實(shí)驗(yàn)、成球?qū)嶒?yàn)、自噬、磷酸化、神經(jīng)炎癥、遷移、代謝組學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)、凋亡和增殖抑制等。

細(xì)胞標(biāo)志物

人卵巢癌細(xì)胞(如HEY細(xì)胞)的標(biāo)志物包括CD10、CD133、CD44、CA-125、Cyclin D1、p53、KIT、PD-L1和BMI1等。這些標(biāo)志物有助于識別和研究卵巢癌細(xì)胞。