今天推薦的是文獻(xiàn)是關(guān)于我們的產(chǎn)品Hep G2人肝癌細(xì)胞(貨號(hào)：IM-H038)被文獻(xiàn)《Sodium p-perfluorous nonenoxybenzene sulfonate induces ROS-mediated necroptosis by directly targeting catalase in HepG2 cells》引用，影響因子為9.8。

文獻(xiàn)信息

英文標(biāo)題：Sodium p-perfluorous nonenoxybenzene sulfonate induces ROS-mediated necroptosis by directly targeting catalase in HepG2 cells

中文標(biāo)題：鈉鹽p-全氟壬氧基苯磺酸通過(guò)直接靶向催化酶在HepG2細(xì)胞中誘導(dǎo)ROS介導(dǎo)的壞死

發(fā)表期刊：《Science of the Total Environment》

影響因子：9.8

作者單位：山東大學(xué)環(huán)境研究所、山東大學(xué)海洋學(xué)院、山東大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院

作者信息：Yiyuan Ye, Bingyan Liu, Zijian Wang, Ling Liu, Qiu Zhang, Qingzhu Zhang, Wei Jiang

研究背景

全氟辛烷磺酸(PFOS)因其獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)而被廣泛使用，但由于其在環(huán)境中的高生物累積性和持久性，PFOS對(duì)人類的潛在毒性引起了廣泛關(guān)注。因此，其他類型的表面活性劑開(kāi)始在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上替代PFOS，例如全氟和多氟有機(jī)化合物。p-全氟壬氧基苯磺酸鹽(OBS)是一種低成本的陰離子表面活性劑，被廣泛用作PFOS的經(jīng)濟(jì)有效替代品。然而，關(guān)于OBS的生物學(xué)效應(yīng)的知識(shí)仍然有限。

研究方法

本研究比較了OBS和PFOS對(duì)人類肝癌細(xì)胞(HepG2)的毒性效應(yīng)。通過(guò)CCK-8細(xì)胞活力測(cè)定、ROS檢測(cè)、壞死檢測(cè)、Western blot分析、CAT活性測(cè)定、NAC處理、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、分子對(duì)接分析、藥物親和力響應(yīng)靶標(biāo)穩(wěn)定性(DARTS)測(cè)定和光譜實(shí)驗(yàn)等方法，研究了OBS對(duì)HepG2細(xì)胞的活性氧(ROS)介導(dǎo)的壞死、催化酶(CAT)水平的影響以及OBS與CAT的直接作用。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖1 OBS和PFOS降低HepG2細(xì)胞存活率

HepG2細(xì)胞暴露于不同濃度的OBS和PFOS，通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)測(cè)量細(xì)胞存活率

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示，n=4

OBS導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低，而PFOS沒(méi)有明顯影響

圖3 OBS誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞壞死

HepG2細(xì)胞暴露于不同濃度的OBS和PFOS，經(jīng)熒光顯微鏡觀察PI和Hoechst染色細(xì)胞

計(jì)算PI陽(yáng)性細(xì)胞與總細(xì)胞的比例，以顯示壞死程度

顯示OBS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，通過(guò)檢測(cè)p-NF-κB P65和NF-κB P65蛋白水平的比值來(lái)衡量

OBS導(dǎo)致壞死程度增加，并上調(diào)p-NF-κB P65水平

圖7 CAT過(guò)表達(dá)恢復(fù)OBS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激、細(xì)胞死亡和壞死

HepG2細(xì)胞經(jīng)CAT過(guò)表達(dá)后暴露于OBS，觀察氧化應(yīng)激、細(xì)胞死亡、RIP1和RIP3蛋白水平的改變。

CAT過(guò)表達(dá)恢復(fù)細(xì)胞存活、抑制ROS水平、壞死、RIP1和RIP3水平。

圖9通過(guò)熒光光譜、同步熒光光譜、RLS光譜和UV-vis光譜實(shí)驗(yàn)來(lái)研究OBS與CAT之間的相互作用。

圖1、圖3、圖7和圖9，它們提供了有關(guān)OBS和PFOS對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性影響的詳細(xì)信息，包括細(xì)胞存活率、氧化應(yīng)激、壞死程度、蛋白質(zhì)水平和相互作用等方面的數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)對(duì)于理解OBS的毒性機(jī)制以及評(píng)估其作為PFOS替代品的可行性至關(guān)重要。

OBS導(dǎo)致HepG2細(xì)胞的細(xì)胞活力降低、ROS水平升高，并比PFOS引起更嚴(yán)重的壞死。OBS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和壞死在CAT過(guò)表達(dá)后得到恢復(fù)，但NAC預(yù)處理后CAT水平并未逆轉(zhuǎn)。這表明CAT水平的下調(diào)是ROS爆發(fā)的上游信號(hào)。此外，通過(guò)藥物親和力靶向分析、光譜分析和分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)，顯示OBS直接靶向CAT，從而降低CAT水平。OBS誘導(dǎo)的壞死是RIP1/RIP3依賴性的程序性壞死。

研究結(jié)論

OBS導(dǎo)致細(xì)胞活力降低、ROS水平升高和壞死程度加劇，表明其比PFOS具有更高的細(xì)胞毒性。

OBS通過(guò)誘導(dǎo)ROS爆發(fā)和過(guò)氧化氫酶(CAT)的下調(diào)來(lái)引發(fā)氧化應(yīng)激。

在CAT過(guò)表達(dá)后，OBS引起的氧化應(yīng)激得到恢復(fù)，但N-乙酰半胱氨酸(NAC)預(yù)處理后CAT的水平并未完全恢復(fù)，說(shuō)明下調(diào)的CAT是ROS爆發(fā)的上游信號(hào)。

這些發(fā)現(xiàn)有助于理解OBS的毒性，并為評(píng)估OBS作為PFOS替代品的安全性提供了依據(jù)。