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小鼠視網(wǎng)膜muller細胞

貨號:IMP-M163

規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管

形態(tài):長梭形,不規(guī)則細胞樣,貼壁生長

培養(yǎng)基:小鼠視網(wǎng)膜muller細胞完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代比例:首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代是1個T25瓶傳2個T25瓶或2個6cm皿

價格:¥4700

配套相關培養(yǎng)產(chǎn)品

產(chǎn)品簡介

小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞采用膠原酶消化法和胰蛋白酶反復消化法制備而來,小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力最強。視網(wǎng)膜Muller細胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細胞,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。在超微結構水平上,Muller細胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度,更發(fā)達的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細胞形態(tài)也會有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結構和功能的作用,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動,還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。Muller細胞是哺乳動物視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞中重要的一種,結構上貫穿視網(wǎng)膜全層,起支持骨架的作用,功能上更是視網(wǎng)膜代謝中心,對視網(wǎng)膜的正常發(fā)育及功能的維持起決定性作用。而且Muller細胞還參與青光眼、糖尿病視網(wǎng)膜病變等病理過程。

  一、細胞基本屬性
細胞名稱原代小鼠視網(wǎng)膜muller細胞
種屬來源小鼠
組織來源視網(wǎng)膜
生長特性貼壁生長
形態(tài)特征梭形、多角形
質(zhì)量檢測谷氨酰胺合成酶(GS)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基小鼠視網(wǎng)膜muller細胞完全培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率每2-3天換液一次
消化液0.25%胰蛋白酶
產(chǎn)品貨期2-3周
運輸方式復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
  二、細胞培養(yǎng)操作
到貨方式活細胞(常溫運輸)
收貨處理1.收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,是否有破損、漏液、渾濁等現(xiàn)象。如果有,請立即和我們聯(lián)系;如果沒有,請您用75%酒精消毒細胞瓶外壁,再將其置于37度培養(yǎng)箱靜置4h。
2.靜置后觀察細胞狀態(tài),在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20X物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。拍照反饋給我們。
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代方法1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
到貨方式凍存細胞(干冰運輸)
收貨處理1.干冰運輸?shù)募毎截?,請檢查干冰是否完全揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.為保證細胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復蘇細胞,如若不能復蘇請立即轉(zhuǎn)入液氮凍存。
培養(yǎng)皿/瓶一管細胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
復蘇操作1.將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。
2.在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。
3.然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。
4.第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
3. 申請售后時請?zhí)峁┘毎肇洉r及反饋售后當天細胞清晰照片及培養(yǎng)信息,建議客戶在細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5. 細胞在不同實驗室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個人操作習慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同,導致細胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異,對于此類細胞適應環(huán)境生長的行為,不予過度解釋或免費售后。
  三、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
凍存密度如果是有要求每管要凍多少細胞,那就用1ml完培重懸后,取部分按平時方法計數(shù),剩下的細胞按計數(shù)需要的細胞量凍存即可。
如果沒要求,那就按平時,一個皿凍一管。
凍存方法待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
1.收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數(shù)。
2.根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3.將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案

科研細胞購買常見問題

問:為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻里細胞培養(yǎng)條件不一樣呢?

答:部分細胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細胞的培養(yǎng)條件,為了避免細胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應,建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

問:凍存細胞運輸與常溫細胞運輸相比有什么區(qū)別?

答:細胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細胞貨期一般一周左右,復蘇活細胞一個T25瓶發(fā)貨;凍存細胞有庫存的話,一般當天或者隔天可以發(fā)貨,細胞系凍存細胞擔心客戶復蘇不成功所以贈送了一管,實際發(fā)貨2管;原代凍存細胞發(fā)貨1管,凍存細胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運輸,所以凍存細胞需額外支付干冰及運輸費200元。

問:培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶可以重復利用嗎?

答:一般不建議重復利用,特別是貼壁不牢固細胞,重復利用會導致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。

問:運輸細胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?

答:不能回收使用的,運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多,所以收到細胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請及時按照說明書細胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。

問:凍存的細胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對復蘇會有影響嗎?

答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細胞的密度、凍存液配方、溫度導致pH變化等有關,偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細胞狀態(tài)有影響,可以復蘇看下。

問:不同引種單位的同一株細胞,RRID都是一樣的嗎?

答:是的,同一個細胞系只有一個RRID。

科研細胞售后服務

細胞重發(fā)標準

1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);

2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);

3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);

5.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);

6.視具體情況而定。

細胞不予重發(fā)標準

1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā);

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);

7.視具體情況而定。

小鼠視網(wǎng)膜muller細胞培養(yǎng)方法條件

小鼠視網(wǎng)膜muller細胞培養(yǎng)視頻教程

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