常見細胞污染類型如何辨別及預防解決方法
常見細胞污染類型如何辨別及預防解決方法:細胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染,支原體污染,原蟲污染,黑膠蟲污染,真菌污染,病毒污染以及非細胞污染,真菌污染來源,一般是來自實驗服,并且具有氣候性,多雨,氣候濕潤的季節(jié)容易出現(xiàn);真菌污染屬于微生···
貨號:IMP-H127
規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
形態(tài):多角形細胞,貼壁生長
培養(yǎng)基:人腎上腺皮質細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
價格:¥8650
產品規(guī)格:
¥1600
產品規(guī)格:100mL
¥500
產品規(guī)格:100mL
¥98
產品規(guī)格:100mL
¥68
一、細胞基本屬性 | ||||
細胞名稱 | 原代人腎上腺皮質細胞 | |||
種屬來源 | 人 | |||
組織來源 | 腎上腺組織 | |||
生長特性 | 貼壁生長 | |||
形態(tài)特征 | 多角形細胞樣 | |||
質量檢測 | 3β-HSD免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 | |||
產品規(guī)格 | 5x105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |||
培養(yǎng)基 | 人腎上腺皮質細胞專用培養(yǎng)基 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | |||
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 | |||
運輸方式 | T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵) | |||
背景介紹 | 腎上腺是人體相當重要的內分泌器官,位于兩側腎臟的上方。腎上腺左右各一,腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分,周圍部分是皮質,內部是髓質。腎上腺皮質細胞具有分化能力,較專一的形態(tài)變化。 | |||
產品貨期 | 7-8周左右 | |||
運輸方式 | 復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 | |||
供應限制 | 僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 | |||
特別說明 | 以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 | |||
二、細胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨處理 | 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài) | |||
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng) | |||
傳代比例 | 首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | |||
傳代方法 | 1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次; 2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化; 3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng); 4.待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 | |||
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考 客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題可以撥打技術服務電話:400-080-3389 按 2,我們隨時給予解答。 | ||||
三、注意事項 | ||||
重要提醒 | 1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2.在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。 3.傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 | |||
到貨須知 | 1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否完全揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3.由于運輸?shù)脑?,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。 | |||
四、售后服務 | ||||
重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā); 2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā); 3.收到細胞3天內,發(fā)現(xiàn)污染問題,經核實后,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,經核實后,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封,出現(xiàn)污染,經核實后,重發(fā); 6.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發(fā); 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā); 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā); 6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定。 |
問:為什么官網的培養(yǎng)條件和我看的文獻里細胞培養(yǎng)條件不一樣呢?
答:部分細胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細胞的培養(yǎng)條件,為了避免細胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應,建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
問:凍存細胞運輸與常溫細胞運輸相比有什么區(qū)別?
答:細胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細胞貨期一般一周左右,復蘇活細胞一個T25瓶發(fā)貨;凍存細胞有庫存的話,一般當天或者隔天可以發(fā)貨,細胞系凍存細胞擔心客戶復蘇不成功所以贈送了一管,實際發(fā)貨2管;原代凍存細胞發(fā)貨1管,凍存細胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運輸,所以凍存細胞需額外支付干冰及運輸費200元。
問:培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶可以重復利用嗎?
答:一般不建議重復利用,特別是貼壁不牢固細胞,重復利用會導致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。
問:運輸細胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?
答:不能回收使用的,運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經消耗得差不多,所以收到細胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請及時按照說明書細胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。
問:凍存的細胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對復蘇會有影響嗎?
答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細胞的密度、凍存液配方、溫度導致pH變化等有關,偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細胞狀態(tài)有影響,可以復蘇看下。
問:不同引種單位的同一株細胞,RRID都是一樣的嗎?
答:是的,同一個細胞系只有一個RRID。
細胞重發(fā)標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);
3.收到細胞3天內,發(fā)現(xiàn)污染問題,經核實后,重發(fā);
4.常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染,經核實后,重發(fā);
5.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發(fā);
6.視具體情況而定。
細胞不予重發(fā)標準
1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā);
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā);
5.細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);
6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);
7.視具體情況而定。
常見細胞污染類型如何辨別及預防解決方法:細胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染,支原體污染,原蟲污染,黑膠蟲污染,真菌污染,病毒污染以及非細胞污染,真菌污染來源,一般是來自實驗服,并且具有氣候性,多雨,氣候濕潤的季節(jié)容易出現(xiàn);真菌污染屬于微生···
細胞聚團的原因分析及如何避免:培養(yǎng)物中細胞可能聚集的一些原因包括:1.過度消化、2.環(huán)境壓力、3.組織分解、4.過度生長、5.污染等;如何避免聚團細胞的生成;首先確認當前細胞生長密度及狀態(tài),80%左右的生長密度即可進行傳代,此時細胞狀態(tài)較好,且用于傳代的數(shù)量也···
細胞有空泡原因分析及解決方法:出現(xiàn)細胞空泡情況有1.細胞老化2.培養(yǎng)液錯誤配制;3.細胞消化時操作不當;4.污染等等,如細胞老化,解決方法,原代細胞使用較低代次進行實驗,傳代細胞避免傳代次數(shù)過高
細胞半換液和全換液操作步驟:第一種方式:細胞全換液;如果是貼壁細胞,可以用全量換液法,直接吸去全部舊培養(yǎng)基,補充足量新鮮完全培養(yǎng)基;第二種方式:細胞半換液;"細胞半換液"又稱"細胞半量換液",即棄掉一半舊的培養(yǎng)基,再加一半新的進去,選它的原因其實與前面不加···
產品規(guī)格:5*10^5
產品規(guī)格:1*10^6
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產品規(guī)格:5*10^5
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