細(xì)胞培養(yǎng)是以離體細(xì)胞或微生物的無菌操作為基礎(chǔ)，模擬動、植物細(xì)胞生長發(fā)育的實(shí)驗(yàn)條件和環(huán)境下進(jìn)行的一系列細(xì)胞培養(yǎng)操作。細(xì)胞培養(yǎng)對各種實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備和適宜的培養(yǎng)條件有嚴(yán)格的要求。以下我們列出細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室常見的儀器配置清單，供大家參考。需要注意的是：介于每個(gè)實(shí)驗(yàn)室不盡相同，列舉的并不包括所有設(shè)備;具體需要根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)類型和實(shí)驗(yàn)設(shè)備去配置。

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要配備哪些儀器設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室主要儀器設(shè)備包括常規(guī)設(shè)備、滅菌設(shè)備、培養(yǎng)設(shè)備、培養(yǎng)耗材、無菌操作設(shè)備等。熟練掌握它們的結(jié)構(gòu)、用途、使用方法及注意事項(xiàng)是順利完成實(shí)驗(yàn)的重要保證。

一、常規(guī)設(shè)備

主要是用于試劑保存與稱量、培養(yǎng)基配制與分裝和水處理等。如天平、顯微鏡、培養(yǎng)箱、離心機(jī)、水純化裝置等。

1.顯微鏡

倒置顯微鏡——是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室所必需的日常工作常規(guī)使用設(shè)備之一，便于掌握細(xì)胞的生長情況并觀察有無污染等。

2.培養(yǎng)箱

體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，大多數(shù)情況下，最適溫度是37℃，溫差變化一般不應(yīng)超過±0.5℃，細(xì)胞在溫度升高2℃ 時(shí)，持續(xù)數(shù)小時(shí)即不能耐受，40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的培養(yǎng)箱，如具有較高靈敏度的恒溫培養(yǎng)箱及CO2培養(yǎng)箱。

3.水純化裝置

細(xì)胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高，細(xì)胞培養(yǎng)以及與細(xì)胞培養(yǎng)工作相關(guān)的液體的配制用水必須事先嚴(yán)格純化處理。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)配制各種培養(yǎng)液及試劑等均需使用三次蒸餾水：即使是用于玻璃器皿的沖洗，也應(yīng)使用二次以上蒸餾水。

4.冰箱

細(xì)胞培養(yǎng)室必須配備。a、普通冰箱或冷藏柜——儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養(yǎng)用的物品及短期保存組織標(biāo)本。b、低溫冰箱(-20℃)——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長時(shí)期存放的制劑，如酶、血清等。

5.離心機(jī)

進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常規(guī)需要進(jìn)行制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌、收集細(xì)胞等工作，通常需要使用離心機(jī)。一般可常規(guī)配置4000rpm的國產(chǎn)臺式離心機(jī)，例如細(xì)胞沉降，使用80～100g的離心機(jī)即可，離心力過大有時(shí)可能引起細(xì)胞的損傷。

6.天平

常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。

7.生物安全柜

生物安全柜是細(xì)胞培養(yǎng)中用于研究者直接操作細(xì)胞的設(shè)備，通過將柜內(nèi)空氣向外抽吸使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，使樣品避免受到污染，并保護(hù)操作員的人身安全。細(xì)胞培養(yǎng)中通常選擇二級生物安全柜。

二、滅菌設(shè)備

細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境有很高的要求，直接或間接與細(xì)胞接觸的物品/器皿均需進(jìn)行消毒滅菌處理。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室可選用高壓蒸汽滅菌器來對物品進(jìn)行消毒殺菌。

1.高壓蒸汽消毒裝置

培養(yǎng)基、蒸餾水、不含糖的緩沖液、培養(yǎng)器皿及其他用具等均需經(jīng)過高壓蒸汽消毒滅菌后方可使用。高壓滅菌器時(shí)，一般在120℃ ，控溫15 ~ 40分鐘既可切斷電源,緩慢降壓至讀數(shù)為0時(shí)，方可取出滅菌物。

高壓滅菌器：手提式、立式、臥式

2.干燥滅菌器

用于各種用具的滅菌。通常采用160 ~ 180°C持續(xù)90分鐘來滅菌。

3.過濾除菌裝置

目前細(xì)胞培養(yǎng)工作中采用的培養(yǎng)用液，包括人工合成培養(yǎng)液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長因子等物質(zhì)，這些物質(zhì)在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能，因而上述液體多采用濾過消毒以除去細(xì)菌。目前常使用的濾器有Zeiss濾器、玻璃濾器和微孔濾器，各種濾器有其使用原理和特點(diǎn)。

三、培養(yǎng)設(shè)備

1.培養(yǎng)設(shè)備包括培養(yǎng)架、培養(yǎng)箱、搖床和生物反應(yīng)器等。

2.倒置顯微鏡

多用于隔瓶觀察、記錄外植體及懸浮培養(yǎng)物(細(xì)胞團(tuán)、原生質(zhì)體等)的生長情況。

3.雙筒實(shí)體顯微鏡

多用于剝離植物莖尖。

4.細(xì)胞計(jì)數(shù)工具

用作培養(yǎng)細(xì)胞的計(jì)數(shù)和活性的觀察。

5.細(xì)胞冷凍保存裝置-液氮罐

儲存器常用的是液氮容器。為了能長期保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或是細(xì)胞株，要將細(xì)胞進(jìn)行超低溫凍存，這就需要用到液氮罐。液氮的溫度能保持在-196℃，在這個(gè)低溫環(huán)境下細(xì)胞活性以及新陳代謝將會降到最低水平，適于長期保存。

6.其他儀器如磁力攪拌器、恒溫水浴箱、振蕩器、超聲波清洗儀等。

四、細(xì)胞培養(yǎng)耗材

細(xì)胞的生長、保存、觀察、分析離不開各種容器耗材，如細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、玻底培養(yǎng)皿、細(xì)胞小室、搖瓶等，注意無論是一次性使用還是培養(yǎng)后重復(fù)使用，均需要進(jìn)行消毒處理。

1.培養(yǎng)器皿

培養(yǎng)瓶：由玻璃或塑料制成。主要用于培養(yǎng)、繁殖細(xì)胞。進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞，膠塞多用于密封培養(yǎng)。國產(chǎn)培養(yǎng)瓶的規(guī)格以容量(ml)表示，如250ml、100ml、25ml等;進(jìn)口培養(yǎng)瓶則多以底面積(cm2)表示。

培養(yǎng)皿：由玻璃或塑料制成，供盛取、分離、處理組織或做細(xì)胞毒性、集落形成、單細(xì)胞分離、同位素?fù)饺?、?xì)胞繁殖等實(shí)驗(yàn)使用。常用的培養(yǎng)皿規(guī)格有10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

多孔培養(yǎng)板：為塑料制品?？晒┘?xì)胞克隆及細(xì)胞毒性等各種檢測實(shí)驗(yàn)使用。其優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約樣本及試劑，可同時(shí)測試大量樣本，易于進(jìn)行無菌操作。培養(yǎng)板分為各種規(guī)格，常用的規(guī)格有：96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。

貯液瓶：常見的為藍(lán)蓋瓶，主要用于存放或配制各種培養(yǎng)用液體如培養(yǎng)液、血清及試劑等。貯液瓶分為各種不同規(guī)格，如1000ml、500ml、250ml、 100ml、50ml、5ml等。

吸管：主要分為刻度吸管、無刻度吸管?？潭任苤饕糜谖?、轉(zhuǎn)移液體，常用的有1ml、2ml、5ml、10ml等規(guī)格。無刻度吸管分為直頭吸管及彎頭吸管，除可以作吸取、轉(zhuǎn)移液體外，彎頭尖吸管還常用于吹打、混勻及傳代細(xì)胞。

加樣器(移液器)：分為微量移液器和電動移液器。用于吸取、移動液體或滴加樣本?？筛鶕?jù)需要調(diào)節(jié)量的大小，吸量準(zhǔn)確、方便?？杀ＷC實(shí)驗(yàn)樣品(或試劑)含量精確，重復(fù)性良好。

其他用品：尚有收集細(xì)胞用的離心管，放置試劑或臨時(shí)插置吸管用的試管，裝放吸管以便消毒的玻璃或不銹鋼容器，用于存放小件培養(yǎng)物品便于高壓消毒的鋁制飯盒或貯槽，套于吸管頂部的橡膠吸頭，封閉各種瓶、管的膠塞、蓋子、凍存細(xì)胞用的安瓿或凍存管、不同規(guī)格的注射器、燒杯和量筒以及漏斗，超凈工作臺使用的酒精燈，供實(shí)驗(yàn)人員操作前清潔消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型噴壺等。

2.手套

細(xì)胞培養(yǎng)過程中進(jìn)行各種操作都必需戴上手套進(jìn)行，以免細(xì)胞受到污染。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室推薦使用一次性丁腈手套，不含過敏原，不含蛋白質(zhì)、氨基化合物及其他有害物質(zhì)，適用于嚴(yán)格的無塵室環(huán)境。

3.器械

主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時(shí)持取物件。

常用的有：手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪(彎剪及直剪)，用于解剖動物、分離及切剪組織，制備原代培養(yǎng)的材料;眼科虹膜小剪(彎剪或直剪)，用于將組織材料剪成小塊;血管鉗及組織鑷、眼科鑷(彎、直)，用于持取無菌物品(如小蓋玻片)夾持組織等;口腔科探針或代用品，用以放置原代培養(yǎng)之組織小塊。

五、無菌操作設(shè)備

超凈(凈化)工作臺是目前已普遍應(yīng)用的無菌操作裝置。

超凈工作臺的工作原理是利用鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動空氣遁過高效濾器除去空氣中的塵埃顆粒，使空氣得到凈化。凈化空氣徐徐通過工作臺面，使工作臺內(nèi)構(gòu)成無菌環(huán)境。

六、特殊設(shè)備

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室除了應(yīng)配備上述的基本設(shè)備以外，如有條件，可添置一些特殊或先進(jìn)的儀器設(shè)備，以便更有效、更精確、更深入地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室工作。例如：

1)酶聯(lián)免疫檢測儀——可用于進(jìn)行免疫學(xué)測定及細(xì)胞毒性、藥物敏感性檢測等。

2)超低溫冰箱(-80℃)——便于儲存某些試劑及標(biāo)本。

3)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)器——用于某些特殊細(xì)胞或需要收獲大量細(xì)胞的培養(yǎng)。

4)熒光顯微鏡——進(jìn)行熒光染色樣本的觀察。

5)流式細(xì)胞儀——可更精確及快速檢測細(xì)胞。

6)用于檢測細(xì)胞培養(yǎng)條件的各種儀器，例如專門為快速分析細(xì)胞培養(yǎng)基中主要或關(guān)鍵營養(yǎng)成分、代謝產(chǎn)物及氣體含量設(shè)計(jì)的多功能細(xì)胞培養(yǎng)分析儀、手提式CO2濃度測定儀等。

七、其余儀器

對于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)還可能需要振蕩器及磁力攪拌器用于混勻液體;還有一些沾滿細(xì)胞的難清洗的不銹鋼類或玻璃類器皿，則需要超聲波清洗機(jī)的幫助;如果涉及免疫實(shí)驗(yàn)，肯定需要冰浴，碎冰的需求量大的話，則需要購買制冰機(jī);另外破碎細(xì)胞可能會需要超聲波細(xì)胞破碎儀。

以上是關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要配備的儀器設(shè)備清單，僅供大家參考，具體配置需根據(jù)各位老師、使用者的實(shí)際需求策劃。