常見細(xì)胞污染類型如何辨別及預(yù)防解決方法
常見細(xì)胞污染類型如何辨別及預(yù)防解決方法:細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染,支原體污染,原蟲污染,黑膠蟲污染,真菌污染,病毒污染以及非細(xì)胞污染,真菌污染來源,一般是來自實(shí)驗(yàn)服,并且具有氣候性,多雨,氣候濕潤的季節(jié)容易出現(xiàn);真菌污染屬于微生···
貨號(hào):IMP-R205 產(chǎn)品貨期:2周左右
規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
形態(tài):不規(guī)則細(xì)胞樣,貼壁生長
培養(yǎng)基:大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基
細(xì)胞鑒定:NSE免疫熒光染色為陽性,細(xì)胞純度高于90%
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,增殖能力很弱,收到細(xì)胞鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),不建議傳代進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)和凍存
價(jià)格:¥5200
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
¥2580
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
¥500
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
¥98
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
¥68
背根神經(jīng)節(jié)是各椎間孔內(nèi)側(cè)面附近脊髓背根的膨脹結(jié)節(jié)。
神經(jīng)節(jié)是功能相同的神經(jīng)元細(xì)胞體在中樞以外的周圍部位集合而成的結(jié)節(jié)狀構(gòu)造。由于該細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞,客戶收到以后 ,不建議傳代。
細(xì)胞名稱 | 原代大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(NSE免疫熒光染色為陽性) | |||
種屬來源 | 大鼠 | |||
細(xì)胞鑒定 | NSE免疫熒光染色為陽性,細(xì)胞純度高于90% | |||
組織來源 | 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常脊髓組織 | |||
生長特性 | 貼壁生長 | |||
形態(tài)特征 | 不規(guī)則細(xì)胞 | |||
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25或1mL凍存管 | |||
培養(yǎng)基 | 大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
傳代特征 | 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 |
大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 為終末分化細(xì)胞,增殖能力很弱,建議發(fā)貨T25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸,客戶收到細(xì)胞鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),不建議傳代進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)和凍存。
僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
1.收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,是否有破損、漏液、渾濁等現(xiàn)象。如果有,請立即和我們聯(lián)系;如果沒有,請您用75%酒精消毒細(xì)胞瓶外壁,封口膜撕掉,再將其置于37度培養(yǎng)箱靜置4h。
2.靜置后觀察細(xì)胞狀態(tài),在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X和20X物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。拍照反饋給我們。
3.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
4.因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
5.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
6.細(xì)胞在不同實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個(gè)人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異。
問:為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻(xiàn)里細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣呢?
答:部分細(xì)胞是會(huì)出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實(shí)驗(yàn)室在保藏過程中更改了細(xì)胞的培養(yǎng)條件,為了避免細(xì)胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應(yīng),建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
問:凍存細(xì)胞運(yùn)輸與常溫細(xì)胞運(yùn)輸相比有什么區(qū)別?
答:細(xì)胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細(xì)胞貨期一般一周左右,復(fù)蘇活細(xì)胞一個(gè)T25瓶發(fā)貨;凍存細(xì)胞有庫存的話,一般當(dāng)天或者隔天可以發(fā)貨,細(xì)胞系凍存細(xì)胞擔(dān)心客戶復(fù)蘇不成功所以贈(zèng)送了一管,實(shí)際發(fā)貨2管;原代凍存細(xì)胞發(fā)貨1管,凍存細(xì)胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運(yùn)輸,所以凍存細(xì)胞需額外支付干冰及運(yùn)輸費(fèi)200元。
問:培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎?
答:一般不建議重復(fù)利用,特別是貼壁不牢固細(xì)胞,重復(fù)利用會(huì)導(dǎo)致吸附性變差,漂浮增多;一個(gè)T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。
問:運(yùn)輸細(xì)胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?
答:不能回收使用的,運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多,所以收到細(xì)胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請及時(shí)按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。
問:凍存的細(xì)胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對(duì)復(fù)蘇會(huì)有影響嗎?
答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān),偶爾有遇到這種情況,不是絕對(duì)性對(duì)細(xì)胞狀態(tài)有影響,可以復(fù)蘇看下。
問:不同引種單位的同一株細(xì)胞,RRID都是一樣的嗎?
答:是的,同一個(gè)細(xì)胞系只有一個(gè)RRID。
細(xì)胞重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);
5.細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);
6.視具體情況而定。
細(xì)胞不予重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā);
5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā);
7.視具體情況而定。
常見細(xì)胞污染類型如何辨別及預(yù)防解決方法:細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染,支原體污染,原蟲污染,黑膠蟲污染,真菌污染,病毒污染以及非細(xì)胞污染,真菌污染來源,一般是來自實(shí)驗(yàn)服,并且具有氣候性,多雨,氣候濕潤的季節(jié)容易出現(xiàn);真菌污染屬于微生···
細(xì)胞聚團(tuán)的原因分析及如何避免:培養(yǎng)物中細(xì)胞可能聚集的一些原因包括:1.過度消化、2.環(huán)境壓力、3.組織分解、4.過度生長、5.污染等;如何避免聚團(tuán)細(xì)胞的生成;首先確認(rèn)當(dāng)前細(xì)胞生長密度及狀態(tài),80%左右的生長密度即可進(jìn)行傳代,此時(shí)細(xì)胞狀態(tài)較好,且用于傳代的數(shù)量也···
細(xì)胞有空泡原因分析及解決方法:出現(xiàn)細(xì)胞空泡情況有1.細(xì)胞老化2.培養(yǎng)液錯(cuò)誤配制;3.細(xì)胞消化時(shí)操作不當(dāng);4.污染等等,如細(xì)胞老化,解決方法,原代細(xì)胞使用較低代次進(jìn)行實(shí)驗(yàn),傳代細(xì)胞避免傳代次數(shù)過高
細(xì)胞半換液和全換液操作步驟:第一種方式:細(xì)胞全換液;如果是貼壁細(xì)胞,可以用全量換液法,直接吸去全部舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充足量新鮮完全培養(yǎng)基;第二種方式:細(xì)胞半換液;"細(xì)胞半換液"又稱"細(xì)胞半量換液",即棄掉一半舊的培養(yǎng)基,再加一半新的進(jìn)去,選它的原因其實(shí)與前面不加···
產(chǎn)品規(guī)格:5*10^5
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