常見(jiàn)細(xì)胞污染類(lèi)型如何辨別及預(yù)防解決方法
常見(jiàn)細(xì)胞污染類(lèi)型如何辨別及預(yù)防解決方法:細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類(lèi)型有7種,分別是細(xì)菌污染,支原體污染,原蟲(chóng)污染,黑膠蟲(chóng)污染,真菌污染,病毒污染以及非細(xì)胞污染,真菌污染來(lái)源,一般是來(lái)自實(shí)驗(yàn)服,并且具有氣候性,多雨······
非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero細(xì)胞)是非洲綠猴腎細(xì)胞,是一種異倍體細(xì)胞,經(jīng)獼猴腎細(xì)胞培養(yǎng)衍化后產(chǎn)生的,和著名的Hela細(xì)胞系、犬腎細(xì)胞(MDCK細(xì)胞)一樣是常用的細(xì)胞系。
非洲綠猴腎細(xì)胞用于疫苗生產(chǎn)中的病毒培養(yǎng)基質(zhì)細(xì)胞,是在限定代次內(nèi)不致癌的異倍體細(xì)胞, 世界衛(wèi)生組織批準(zhǔn)可以用于人類(lèi)疫苗的生產(chǎn)基質(zhì)??婆d生物和中國(guó)生物的新冠疫苗是用非洲綠猴腎細(xì)胞作為培養(yǎng)基質(zhì)細(xì)胞的。
中文名稱(chēng) | 非洲綠猴腎細(xì)胞 | 英文名稱(chēng) | Verda Reno;Vero |
發(fā)現(xiàn)人 | Yasumura 和 Kawakita | 發(fā)現(xiàn)時(shí)間 | 1962年3月27日 |
產(chǎn)地 | 非洲 | 年齡 | 成年 |
組織來(lái)源 | 正常腎 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
Vero細(xì)胞系是從非洲綠猴的腎臟上皮細(xì)胞中分離培養(yǎng)出來(lái)的。這個(gè)細(xì)胞系由日本千葉大學(xué)的Yasumura 和 Kawakita 于1962年3月27日擴(kuò)增出來(lái),1964年6月15日B. Simizu將其從千葉大學(xué)帶到國(guó)立健康研究所(NIH)國(guó)立過(guò)敏及傳染病研究所熱帶病毒實(shí)驗(yàn)室時(shí),已傳至第93代。該細(xì)胞系取"Verda Reno"(世界語(yǔ)意為"綠色的腎臟)的簡(jiǎn)寫(xiě)而命名為"Vero",而"Vero"本身在世界語(yǔ)中也有"真相"的意思。
vero細(xì)胞形態(tài)圖
1.vero細(xì)胞用于檢查大腸桿菌毒素。大腸桿菌毒素最初就因此細(xì)胞系而被命名為Vero毒素,后來(lái)被稱(chēng)為志賀菌素樣毒素,因?yàn)樗c在痢疾志賀菌中分離出來(lái)的志賀菌素很相似。
2.作為培養(yǎng)病毒的細(xì)胞宿主。比如:測(cè)定某種藥物對(duì)病毒復(fù)制速度的影響,檢驗(yàn)是否存在狂犬病毒或者為了研究目的培養(yǎng)病毒。
3.作為真核寄生蟲(chóng)的宿主細(xì)胞,尤其是錐體蟲(chóng)屬。
4.用于疫苗生產(chǎn)中的病毒培養(yǎng)基質(zhì)細(xì)胞,是在限定代次內(nèi)不致癌的異倍體細(xì)胞,WHO批準(zhǔn)可以用于人類(lèi)疫苗的生產(chǎn)基質(zhì)。
非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero細(xì)胞)是世界衛(wèi)生組織和我國(guó)生物制品規(guī)程認(rèn)可的疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系。其來(lái)源方便,可連續(xù)傳代,生長(zhǎng)速度快;對(duì)多種病毒的感染敏感、病毒增殖滴度高;遺傳性狀穩(wěn)定,惡性轉(zhuǎn)化程度低,生物安全性較高,培養(yǎng)條件要求不苛刻,易于在生物反應(yīng)器實(shí)施大規(guī)模培養(yǎng)而被廣泛使用。隨著對(duì)疫苗質(zhì)量和安全性要求的不斷提高,尤其是疫苗的接種對(duì)象主要是大范圍的健康人群,因此其質(zhì)量和安全性一直是備受關(guān)注的首要問(wèn)題。疫苗的質(zhì)量和安全性在很大程度上取決于疫苗的生產(chǎn)方式及其過(guò)程。用無(wú)血清培養(yǎng)基取代含血清培養(yǎng)基培養(yǎng),Vero 細(xì)胞已成為病毒疫苗生產(chǎn)的一個(gè)重要發(fā)展趨勢(shì)。
Vero細(xì)胞是世界衛(wèi)生組織和我國(guó)生物制品規(guī)程認(rèn)可的疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系。與用作疫苗生產(chǎn)的原代細(xì)胞、二倍體細(xì)胞和其他一些傳代細(xì)胞基質(zhì)相比,Vero細(xì)胞具有以下特點(diǎn)
① 來(lái)源方便, 可連續(xù)傳代,生長(zhǎng)速度快
② 對(duì)多種病毒的感染敏感、病毒增殖滴度高
③ 遺傳性狀穩(wěn)定,惡性轉(zhuǎn)化程度低,生物安全性較高
④ 培養(yǎng)條件要求不苛刻, .易于在生物反應(yīng)器實(shí)施大規(guī)模培養(yǎng)。
(1) 疫苗生產(chǎn):如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗等)、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2) 基因工程藥物生產(chǎn):如在臨床醫(yī)學(xué)中具有治療價(jià)值的- -些細(xì)胞生長(zhǎng)因子如干擾素、粒細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胸腺肽等。
(3) 診斷用和藥用單克隆抗體生產(chǎn)。
(4) 細(xì)胞工程藥物生產(chǎn):生物細(xì)胞內(nèi)的一- 些生物活性多肽,生物活性物質(zhì)等
Vero細(xì)胞系是連續(xù)的非整倍體細(xì)胞 。連續(xù)細(xì)胞系可以經(jīng)過(guò)許多分裂周期而不衰老。非整倍體是指細(xì)胞中的染色體數(shù)目與通常的不同。Vero 細(xì)胞有干擾素分泌缺陷的特點(diǎn);與其它普通哺乳動(dòng)物細(xì)胞不同,當(dāng)被病毒感染時(shí),它不能分泌干擾素,但它仍然具有α/β干擾素的受體,所以對(duì)于其它來(lái)源的干擾素仍有正常的反應(yīng)。
1. 俞永新,董關(guān)木,朱家鴻.狂犬病和狂犬病疫苗.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2009-1:192
2. World Health Organization Requirements for continuous cell lines used for biological substances[J].WHO Tech Rep Ser,1987,745:99-115.
3. World Health Organization Requirements for rabies vaccine (inactivated)
for human use produced in continuous cell lines[J].WHO Tech Rep Ser,
1987,760:167-189.
常見(jiàn)細(xì)胞污染類(lèi)型如何辨別及預(yù)防解決方法:細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類(lèi)型有7種,分別是細(xì)菌污染,支原體污染,原蟲(chóng)污染,黑膠蟲(chóng)污染,真菌污染,病毒污染以及非細(xì)胞污染,真菌污染來(lái)源,一般是來(lái)自實(shí)驗(yàn)服,并且具有氣候性,多雨······
細(xì)胞聚團(tuán)的原因分析及如何避免:培養(yǎng)物中細(xì)胞可能聚集的一些原因包括:1.過(guò)度消化、2.環(huán)境壓力、3.組織分解、4.過(guò)度生長(zhǎng)、5.污染等;如何避免聚團(tuán)細(xì)胞的生成;首先確認(rèn)當(dāng)前細(xì)胞生長(zhǎng)密度及狀態(tài),80%左右的生長(zhǎng)密度即可進(jìn)行······
細(xì)胞有空泡原因分析及解決方法:出現(xiàn)細(xì)胞空泡情況有1.細(xì)胞老化2.培養(yǎng)液錯(cuò)誤配制;3.細(xì)胞消化時(shí)操作不當(dāng);4.污染等等,如細(xì)胞老化,解決方法,原代細(xì)胞使用較低代次進(jìn)行實(shí)驗(yàn),傳代細(xì)胞避免傳代次數(shù)過(guò)高···
細(xì)胞半換液和全換液操作步驟:第一種方式:細(xì)胞全換液;如果是貼壁細(xì)胞,可以用全量換液法,直接吸去全部舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充足量新鮮完全培養(yǎng)基;第二種方式:細(xì)胞半換液;"細(xì)胞半換液"又稱(chēng)"細(xì)胞半量換液",即棄掉一半舊的培養(yǎng)基,再······
產(chǎn)品規(guī)格:1*10^6
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