產(chǎn)品簡介

本產(chǎn)品利用等溫擴增技術(shù)與可視化顏色變化能夠快速檢測細胞培養(yǎng)液中常見的8種支原體，無需DNA提取，直 接在反應(yīng)液中加1 μL細胞培養(yǎng)上清，65℃反應(yīng) 30min，陽性樣本反應(yīng)液顏色由黃色變?yōu)榧t色，整個過程無需PCR儀，無需開蓋電泳，可有效避免氣溶膠造成的交叉污染。與傳統(tǒng)的PCR法相比，本產(chǎn)品操作簡便、靈敏度非常高，可耐受培養(yǎng)基中的多種 PCR抑制劑，因此不會出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，檢測結(jié)果與qPCR具有極高的一致性。

產(chǎn)品信息

試劑盒組成

包含顯色劑。

實驗前準備

65C水浴鍋或金屬浴；

一步法快速支原體檢測試劑盒操作步驟

待測樣本準備

1) 貼壁細胞：直接吸取上清。建議在細胞接種或換液 3 天以上，匯合度達到 90%左右時取樣，此時上清中支原體含量較高，容易檢出。

2) 懸浮細胞：1000 rpm 離心 5 min 后，取上清。建議在細胞接種或換液 3 天以上時取樣，此時細胞培養(yǎng)液中支原體含量較高，容易檢出。

2.反應(yīng)體系

a：Mycored Buffer 解凍后顛倒混勻使用。

b：根據(jù)樣本數(shù)量；將以上反應(yīng)體系配好之后,分裝到反應(yīng)管中,加入20μL 的 Paraffin Oil,再進行下一步。

3.加樣

1)陰性對照：第一個反應(yīng)管中不加任何樣本作為陰性對照；

2)陽性對照：向最后一個反應(yīng)管中加入1μL Positive Control作為陽性對照；

3)待測樣本：向其余反應(yīng)管中加入1μL細胞培養(yǎng)上清。

請將槍頭伸向Paraffin Oil 液面下加樣。

4.反應(yīng)條件

將反應(yīng)管轉(zhuǎn)移至提前預(yù)熱的65℃水浴鍋或金屬浴中，孵育 30min。

結(jié)果判定

反應(yīng)結(jié)束后立即將反應(yīng)管取出，待恢復(fù)至室溫后,如果反應(yīng)液仍為黃色,判斷結(jié)果為陰性;如果反應(yīng)液變?yōu)榧t色，判斷結(jié)果則為陽性。反應(yīng)管不可開蓋,否則很容易導(dǎo)致氣溶膠污染。

注意事項

1.反應(yīng)結(jié)束后請勿打開反應(yīng)管。

2.建議在配制反應(yīng)液過程中使用帶濾芯的吸頭,并將棄掉的吸頭和反應(yīng)管放入自封袋中,及時處理。

3.請經(jīng)常使用核酸清除劑(推薦G3020)擦拭實驗臺和移液器。