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ATCC細胞培養(yǎng)
貨號:IMI-SP01H1
價格:規(guī)格:
貨號:IMI-SP01H1
規(guī)格:1x106cells/T25或1mL凍存管
形態(tài):球形細胞樣,懸浮生長
培養(yǎng)基:NSPC擴增培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代比例:500000 cells/mL 接種傳代(約1:2至1:3)
產(chǎn)品貨期:1周左右
一、細胞基本屬性 | ||||
細胞名稱 | hPSC誘導(dǎo)分化神經(jīng)干/祖細胞(iNSPC-H1) | |||
種屬來源 | 人 | |||
組織來源 | 人胚胎干細胞(H1) | |||
生長特性 | 懸浮生長 | |||
細胞形態(tài) | 球形細胞樣 | |||
細胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | |||
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
培養(yǎng)基 | NSPC擴增培養(yǎng)基(含NSPC擴增基礎(chǔ)培養(yǎng)基,貨號IMI-SP01BM2;NSPC擴增培養(yǎng)基補充劑,貨號IMI-SP01C) | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
傳代方法 | 500000 cells/mL 接種傳代(約1:2至1:3) | |||
凍存條件 | 神經(jīng)細胞無血清凍存液(貨號IMC-704),液氮儲存 | |||
支原體檢測 | 無 | |||
免疫熒光鑒定 | ![]() | |||
細胞貨期 | 現(xiàn)貨,1周左右 | |||
發(fā)貨方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 | |||
供應(yīng)限制 | 僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
特別說明 | 以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 | |||
二、細胞培養(yǎng)操作 | ||||
復(fù)蘇細胞 | 將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL NSPC擴增培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL NSPC擴增培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量NSPC擴增培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)的低吸附六孔板(1孔)或低吸附35mm皿中培養(yǎng)過夜。24h后,100g離心棄去上清,換成不含Y-27632的NSPC擴增培養(yǎng)基,視培養(yǎng)基顏色或隔2天半量換液。 | |||
細胞傳代 | 當神經(jīng)球直徑達100-150μm時,即可進行傳代培養(yǎng)。 a、100g離心棄去上清,加入1-2 mL Accutase(含10μM Y-27632),置于37℃水浴消化10-15 min。 b、10-15 min后每孔加入等量 NSPC擴增培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞,使細胞解離成小團塊或單細胞。 c、將細胞懸液收集到15 mL離心管中,室溫下300 g離心5 min。 d、仔細抽吸上清液,不干擾細胞,用1mL恢復(fù)室溫的NSPC擴增培養(yǎng)基重懸細胞,輕輕地上下移液以確保細胞溶液均勻。 e、使用自動細胞計數(shù)器計數(shù)細胞,使用臺盼藍排除死亡細胞,使用NSPC擴增培養(yǎng)基稀釋細胞,將細胞以5×105/mL(或1:2-1:3比例)接種到低吸附六孔板中。 | |||
細胞凍存 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面以低吸附T25為例; a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入離心管中,100g離心5 min,棄上清液,加入2 mL Accutase(含10μM Y-27632)水浴消化15 min,。 b、根據(jù)細胞數(shù)量加入神經(jīng)細胞無血清凍存液,使細胞密度1×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
培養(yǎng)注意事項 | 1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。 3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。 4. 客戶可購買逸漠生物NSPC擴增培養(yǎng)基(含NSPC擴增基礎(chǔ)培養(yǎng)基,貨號IMI-SP01BM2;NSPC擴增培養(yǎng)基補充劑,貨號IMI-SP01C)。 5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 6.該細胞僅供科研使用。 7. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 8. 注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者1個六孔板(或按照底面積換算),必須使用低吸附培養(yǎng)器皿,或經(jīng)過特殊液體潤洗使得細胞難以貼于培養(yǎng)器皿表面。 | |||
備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)服務(wù)電話:400-080-3389 按 2,我們隨時給予解答。 | ||||
三、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā); 2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā); 3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā); 6.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā); 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā); 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā); 6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定。 |
產(chǎn)品規(guī)格:1*10^6
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